آب کروماتوگرافی ( HPLC ): آب کروماتوگرافی با فشار بالا (HPLC) یک روش تجزیه و تحلیل شیمیایی است که در آن نمونه‌های مختلف از ترکیبات شیمیایی از طریق یک ستون کروماتوگرافی با فشار بالا عبور می‌کنند. این روش برای جداسازی، تشخیص و اندازه‌گیری ترکیبات مختلف در یک نمونه استفاده می‌شود. در این فرآیند، نمونه با استفاده از یک حلال به ستون کروماتوگرافی تزریق می‌شود و سپس توسط یک جریان محلول حامل به طول ستون حرکت می‌کند.
ترکیبات مختلف با سرعت‌های مختلف در این فرآیند به دلیل تفاوت‌های در جذب و متراکم شدن در ستون جدا می‌شوند. سپس با استفاده از دتکتورهای مختلف، ترکیبات جداشده شناسایی و اندازه‌گیری می‌شوند. HPLC یکی از روشهای پرکاربرد و موثر در تجزیه و تحلیل شیمیایی است و در زمینه‌های مختلفی از جمله صنایع دارویی، غذایی، پزشکی و شیمیایی مورد استفاده قرار می‌گیرد.
آب کروماتوگرافی (HPLC)
به آب های خالص تر از آب مقطرکه هدایت الکتریکی آنها کمتر از 2میکروزیمنس بر سانتی متر باشد آب یا آب کروماتوگرافی ( HPLC ) اطلاق می شود. حداکثر خلوص آب از نظر هدایت الکتریکی تا 0.056 میکرو زیمنس می تواند برسد.در تجزیه و تحلیل ،برای استفاده در تهیه مراحل موبایل و نمونه ها ضروری است .
اگر ناخالصی ها در یک فاز متحرک وجود داشته باشند،می توانند سیگنال های پس زمینه را افزایش دهند .که می توانند باعث افزایش سر و صدای پایه،رانش یا ایجاد پدیده های دیگر مانند قله های منفی یاناشناخته در هنگام شستشو شوند. اگر ناخالصی ها شامل یک جزء هدف باشند که مورد تجزیه و تحلیل قرار می گیرند. می توانند روی مقادیر کمی نیز تاثیر بگذارند. برای جلوگیری از مقابله با چنین مشکلاتی، در مورد برخی اصول اولیه آب بحث می کند.
خلوصآب کروماتوگرافی ( HPLC ) چیست ؟
استاندارد JISK 0124:2013 قوانین کلی برای کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا موارد زیر (گزیده ای)را مشخص می کند .
آب مورد استفاده برای این استاندارد باید با ترکیبی از:
- اسمز معکوس
- تقطیر
- تبادل یونی
- تابش ماوراءبنفش
- فیلتر یا روشهای دیگر تصفیه شود
- دارای سطح کیفیت آب می باشد که در تجزیه و تحلیل هیچگونه دخالت ندارد.
- کیفیت آب باید بر اساس مقادیر شاخص مانند مقاومت ویژه ماده آلی کل (TOC) یا مقادیرجذب ارزیابی شود .
از چه آبی باید در آب کروماتوگرافی فاز معکوس استفاده شود؟آب کروماتوگرافی ( HPLC )
از انجا که آب کروماتوگرافی ( HPLC ) فاز معکوس، به طور معمول به عنوان یک روش برای تجزیه و تحلیل یا جداسازی مواد آلی استفاده می شود.آب مورد استفاده برای تهیه فازهای متحرک یا نمونه ها باید به اندازه کافی عاری از هرگونه ماده آلی باشد.میزان خلوص مورد نیاز بستگی به ردیاب خاص مورد استفاده دارد .
در صورت استفاده از ردیاب جذب ماوراءبنفش،معمولا از آب کروماتوگرافی ( HPLC ) تجاری استفاده می شود .ناخالصی هایی با جذب در منطقه UV از آب مقطر تجاری خارج شده و میزان جذب در مناطق با طول موج کوتاه تر تضمین می شود.و معمولا آب درجه بدون نگرانی قابل استفاده است.اگر خودتان آب را تصفیه کنید،تقطیر و تصفیه تبادل یونی به تنهایی کافی نیست .که در اینجا نیاز به یک سیستم تولید آب فوق العاده خالص توصیه می شود.در سالهای اخیر،روند استفاده از سیستم های تولید آب فوق العاده خالص است که می تواند با استفاده از تابش ماوراءبنفش برای تجزیه مواد آلی کل کربن آلییا TOC را کاهش دهد.
